简石生物微量总RNA提取试剂盒(TR206)
产品品牌:简石生物
产品货号:TR206
产品规格:50次;200次;50次含Dnase I;200次含Dnase I
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产品介绍
产品简介:
简石生物微量总RNA提取试剂盒(TR206)适用于从细胞,组织,酵母菌,植物,细菌或生物液体(任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品)中提取到总RNA(含microRNA);使用该试剂盒无需进行相分离,无需使用氯仿,无需沉淀过程,提取到的RNA不含DNA,并可应用于qPCR,高通量测序等实验;整个过程仅需10分钟。
产品属性:
1、样品来源:TRIZOL等类似试剂裂解的样品;
2、样品范围:≥ 17核苷酸;
3、RNA纯度:高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验;
4、RNA结合量:每个柱子可最多结合10μg的RNA。
产品操作步骤:
整个步骤是由2部分组成:(I)样品裂解匀浆;(II)样品纯化。
注:以下离心力如无特殊说明均在10,000-16,000xg范围内离心1分钟。
(I) 样品裂解匀浆
此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量,以下给出简石提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。
a. 组织
组织:每5mg组织加300μL的TRIcom。裂解之后需要离心去除不溶的组织,然后将上清移置到一个RNase-free的离心管内进行下面的样品纯化步骤;
b. 细胞
依据细胞的数量来决定所需的TRIcom用量:动物(105细胞以内加100μL, 106 细胞加300μL);细菌(108细胞以内加300μL); 酵母(107 细胞以内加300μL)。
c. 液体样品直接取1体积的液体样品,加入3倍体积裂解液(推荐100μL全血加入300μL以内),充分振荡并且混匀;
(II) 样品纯化:
1. 加入等体积(95-100%)的无水乙醇到上一步TRIcom或TRIZOL裂解液中混匀;
2. 将上述混合物放入套在收集管内的1号C纯化柱里,离心1分钟。去除滤出液;
3. 柱上DNaseI消化处理(推荐)此步骤主要是为了去除痕量的DNA;
a) 添加400μL的RNA洗涤液2到1号C纯化柱里,离心1分钟,去除滤出液;
b) 对于每一次的样品处理需要制备40μL的DNaseI反应液。配比为DNaseI 5μL(6U/μL),DNA消化液35μL;
c)直接添加混匀的40μL DNaseI反应液到1号C纯化柱上,在室温下(20-30℃)孵育15分钟;
4. 添加400μL的RNA洗涤液1到1号C纯化柱里,离心1分钟,去除滤出液;
5. 添加700μL的RNA洗涤液2到1号C纯化柱里,离心2分钟以免洗涤液残留;
6. 取出1号C纯化柱,放入一个无RNA酶的离心管中,在吸附膜的中间部位加15μL RNase-freewater(事先在65 -70℃水浴中加热效果更好),室温放置2分钟,离心1分钟洗脱RNA。
产品订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
TR206-50 | 微量总RNA提取试剂盒 | 50次 |
TR206-200 | 200次 | |
TR206- D-50 | 50次含Dnase I | |
TR206- D-200 | 200次含Dnase I |
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