简石生物通用基因组DNA提取试剂盒(TD468)

产品简介：

简石生物通用基因组DNA提取试剂盒(TD468)可从多种样品中提取DNA，如固体组织、全血、细胞、毛发、保存在保护剂里的样品等，一般可回收到大于50 kb的基因组DNA，获得的基因组DNA产量高、纯度好，100µl全血中回收到3µg以上的基因组DNA。

产品特点：

★ 样品种类：固体组织、全血、细胞、毛发、保存在保护剂里的样品等。获得的基因组DNA产量高、纯度好，可以直接用PCR等各种分子生物学实验。不推荐使用此试剂盒提取小DNA或者游离DNA；

★ 基因组DNA大小：一般可回收到大于50 kb的基因组DNA。如果样品中存在线粒体DNA，病毒DNA等也会一起提取到；

★ DNA 纯度：获得的基因组DNA产量高、纯度好，可以直接用PCR等各种分子生物学实验。一般情况 Abs260/280 ≥ 1.8，Abs260/230 ≥ 2.0；

★ 基因组DNA产量：针对哺乳动物组织可从每mg的心脏，脑组织中提取到1-3µg DNA。每mg的肝，肾，肺组织中提取到3-5 µg DNA。100µl全血中回收到3µg以上的基因组DNA。

产品操作步骤：

使用基因组DNA洗脱液或其他等渗溶液（如PBS）来重悬培养的细胞沉淀。（≤1 x 10⁶细胞使用 100 μl 基因组DNA洗脱液10⁶-5 x 10⁶细胞数使用200 μl基因组DNA洗脱液）55℃下的蛋白酶K过夜消化不会影响DNA的完整性。

生物液体和细胞

固体组织

1. 加最多200µl的样品到一个离心管中并且添加：200µl 液体与细胞消化液（红色），20µl 蛋白酶K；

注意：如果样品不足200µl则需要按照比例调整液体与细胞消化液（红色），蛋白酶K及其基因组DNA结合液的用量；

2. 混匀或者涡旋振荡10-15秒然后再55℃下孵育10分钟；

3. 混匀1倍体积的基因组DNA结合液到消化的样品中，混匀或者涡旋振荡10-15秒。例如：添加420µl的基因组DNA结合液到420µl消化的样品中。

1. 添加≤25mg的组织到一个离心管里，并且添加：95µl 水，95µl固体组织消化液（蓝色），10µl 蛋白酶K；

2. 混匀或者涡旋振荡10-15秒然后再55℃下孵育1-3个小时或者直到组织溶解，进行下一步之前混匀；

注意：如果消化后的样品中仍然有不溶解的组织，需要在≥ 12,000 x g的离心力下离心1分钟，然后将上清转移到一个干净的离心管中进行下面的操作；

3. 混匀2倍体积的基因组DNA结合液到上清中，混匀或者涡旋振荡10-15秒。例如：添加400µl的基因组DNA结合液到200µl上清中。

4. 将上清转移至2L柱中，2L柱套在一个收集管里，在≥12,000 xg 离心力下离心1分钟。丢弃盛有滤出液的收集管；

5. 将2L柱套在一个新的收集管里，添加400μl 的基因组DNA洗涤液1到2L 柱中，在≥12,000 xg 离心力下离心1 5分钟，倒掉收集管中的废液；

6. 添加 700μl 的基因组DNA 洗涤液2到2L柱中，在≥12,000 xg 离心力下离心1分钟，倒掉收集管中的废液；

7. 添加 200μl 的基因组DNA 洗涤液2到2L柱中，在≥12,000 xg 离心力下离心1分钟，丢弃盛有滤出液的收集管；

8. 将 2L 柱移至干净的1.5ml 离心管中直接添加≥ 50μl 的基因组 DNA 洗脱液到柱基质上（洗脱液事先在65-70℃水浴中预热效果更好，如果是25mg的组织可以添加200μl），室温下放置2-5分钟，全速离心1分钟来洗脱基因组DNA。

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